Дифтерийный токсин - это экзоантиген Corynebacterium diphtheriae, ингибирующий синтез протеина и убивающий чувствительные клетки. Цель работы - получение одноцепочечных вариабельных фрагментов антител человека (scFv - single-chain variable fragments) против рецепторсвязывающей B-субъединицы дифтерийного токсина. После 3-х раундов селекции фаговой наивной (неиммунной) библиотеки против рекомбинантной B-субъединицы были отобраны 12 специфичных клонов. Нуклеотидные последовательности отобранных антител были гидролизированы эндонуклеазой Mva I, при этом выявлено 6 уникальных рестриктных паттернов. Одноцепочечные антитела были экспрессированы в клетках Escherichia coli XL1-blue и по методу иммуноблотинга определены в бактериальных экстрактах детекцией антителами к Е-тегу. С помощью методом иммуноэнзимного анализа продемонстрирована способность антител связываться с B-субъединицей токсина, при этом константа аффинности для разных клонов составляла от 10<^>6 до 10<^>8 М<^>-1. Поскольку полученные фрагменты антител специфичны к рецепторсвязывающей B-субъединице дифтерийного токсина, целесообразно дальнейшее исследование их токсиннейтрализующих свойств и терапевтического потенциала. Кроме того, полученные scFv-антитела могут быть использованы для детекции и исследования биологических свойств дифтерийного токсина.

  Повний текст PDF - 119.901 Kb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"