Для моделювання процесів, притаманних нейронам за хвороби Паркінсона, було сконструйовано вектор pGLG61-SNCA для експресії у клітинах дріжджів Hansenula рolymorpha химерного конструкту SNCA-GFP, який складався з послідовності гена людського alpha-синуклеїну (SNCA), злитого з геном зеленого флуоресцентного білка (yEGFP). Оскільки патологія дофамінергічних нейронів чорної субстанції середнього мозку у разі хвороби Паркінсона часто розвивається на тлі надсинтезу alpha-синуклеїну, в роботі використовували штами - мультикопійні інтегранти, відібрані за стійкістю до генетицину, що характеризувалися підвищеною флуоресценцією міченого GFP alpha-синуклеїну в цитозолі. Встановлено, що у середовищі з 1 % глюкози (фізіологічні умови культивування дріжджів) частка мертвих клітин штаму NCYC 495/SNCA була помітно вищою у порівнянні зі штамом дикого типу, що свідчить про токсичний ефект гетерологічної експресії гена alpha-синуклеїну. Одержані результати були підтверджені кінетиками росту досліджуваних штамів у рідкій культурі. Для моделювання умов гіпоглікемії у клітинах H. рolymorpha використовували середовище із 0,1 % глюкози. Встановлено, що кількість клітин штаму NCYC 495/ SNCA, в яких детектувався флуоресцентно-мічений alpha-синуклеїн, у перші 18 год культивування швидше зменшувалася на середовищі з низькою концентрацією глюкози (0,1 %) у порівнянні з клітинами, вирощеними на середовищі з високою концентрацією глюкози (1 %), що супроводжувалося прогресивною загибеллю клітин. Одержані дані свідчать про ефективність вибраної моделі для дослідження впливу різних екзогенних чинників і цитотоксичніть alpha-синуклеїну людини.

  Повний текст PDF - 1.091 Mb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"