Клітинна терапія з використанням тромбоцитів є широко поширеним підходом в медицині для загоєння ран і регенерації тканин. Однак, найдоступніші методи надають змогу одержати не достатньо концентровані суспензії тромбоцитів (до <$E0,3~cdot~10 sup 6> 1/мкл) або суспензії тромбоцитів, що частково або повністю втратили свою активність. Мета дослідження - розробити простий та ефективний метод приготування суспензії нативних та інтактних тромбоцитів у концентрації понад <$E1~cdot~10 sup 6> 1/мкл. Збагачену тромбоцитами плазму крові (ЗТПК) одержували зі свіжої крові здорових донорів (n = 5), під час забору крові як антикоагулянт використовували гепарин. Зразки ЗТПК осаджували і ресуспендували в автологічній плазмі крові. Кількість і життєздатність тромбоцитів у кожному зразку визначали шляхом дослідження агрегації на агрегометрі Solar AP2110. Форма тромбоцитів і гранулярність цитоплазми, які вказують на нативність тромбоцитів, контролювали на потоковому цитометрі COULTER EPICS XL. Дослідження агрегації тромбоцитів у ЗТПК, одержаній з використанням різних кількостей гепарину, надали змогу знизити кінцеві концентрації до кількості, яка ефективно запобігала зсіданню крові і не впливала на активність тромбоцитів (5 U/мл). ЗТПК, сконцентрована в 5 разів із загальною концентрацією клітин <$E1~cdot~10 sup 6> 1/мкл, була здатна до активації аденозиндифосфатом (АДФ) (ступінь агрегації <$E54~symbol С~7> %). Кількість клітин зі зміненою формою та гранулярністю в сконцентрованій суспензії не перевищувала 20 %. Ці дані свідчать, про те, що тромбоцити зберігають здатність вивільняти ряд факторів росту та інші біологічно активні сполуки після стимуляції або ін'єкції в тканини за клітинної терапії. Зниження концентрації гепарину до того ж мінімізує крововилив в місці ін'єкції, що сприяє біомедичному застосуванню суспензії. Розроблено простий та ефективний метод приготування висококонцентрованої ЗТП (<$E1,2~cdot~10 sup 6> 1/мкл) для біомедичного використання. Агрегатометрія і протокова цитометрія довели, що одержані тромбоцити інтактні й здатні активуватися. Препарат, що є автологічним, може бути широко використаний для клітинної терапії без додаткових запобіжних заходів.

  Повний текст PDF - 2.387 Mb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"