За допомогою методу фіксації потенціалу на цілій клітині досліджувались трансмембранні калієві струми в соматичній мембрані нейронів гіпокампа в умовах тривалого культивування. На основі активаційних характеристик та даних щодо фармакологічної чутливості був ізольований та описаний потенціалкерований калієвий струм А-типу, що швидко інактивується (КСШI). Транзієнтний КСШI активувався при потенціалах -50...-40 мВ та був чутливим до 4-амінопіридину (4-АП). Позаклітинне прикладення 5 мМ 4-АП призводило до зменшення амплітуди КСШI на 75 , в той час як прикладення 10 мМ тетраетиламонію не викликало її помітних змін. Кінетика активації КСШI описувалась однією експонентою в четвертому ступеню. При зміні потенціалу на мембрані від -40 до 30 мВ постійна часу активації варіювала від 2.8 до 1.5 мс. Кінетика інактивації описувалась однією експонентою з постійною часу, що змінювалась від 37 мс при -45 мВ до 18 мс при 40 мВ. Криві стаціонарної активації та інактивації описувалися рівнянням Больцмана; половинне значення рівня стаціонарної інактивації досягалось при -80 мВ, а стаціонарна активація - при -25 мВ. Кінетика виходу із стаціонарної інактивації описувалась однією експонентою з постійною часу 41 мс. Робиться припущення про те, що КСШI соматичної мембрани нейронів гіпокампа протікає через калієві канали типу Kv4.2.

Із застосуванням методу "петч-клемп" у конфігурації "ціла клітина" були досліджені кальцієві струми через соматичну мембрану культивованих за умов низької щільності нейронів гіпокампа щурів.В сомі всіх досліджених клітин виявлялись низько- та високопороговий компоненти кальцієвого струму.Низькопорогові струми активувались при мембранному потенціалі біля -75мВ та досягали максимальної амплітуди при -45+-4мВ,тоді як високопорогові - при 17+-6мВ.Низькопороговий кальцієвий струм на відміну від високопорогового слабко пригнічувався Cd2+ в малих концентраціях (10-20мкМ),тоді як Ni2+ однаково пригнічував кальцієві струми обох типів.Результати експериментів з органічними блокаторами каналів показали,що в більшості нейронів експресувались високопорогові кальцієві канали принаймні чотирьох типів: L,N,P та нечутливі до застосовуваних блокаторів (здогадно,R-тип).Блокатор кальцієвих каналів L-типу ніфедипін (10мкМ) блокував в середньому 22.7+-5.2,блокатор кальцієвих каналів N-типу omega-СТх-GVIA (1мкМ)-30.0+-5.0,блокатор кальцієвих каналів P-/Q-типів omega-Aga-IVA (200 нМ)-37.2+-13.3 інтегрального високопорогового струму.Резистентний компонент складав 15.7+-5.1 даного струму.Зроблено висновок про те,що при культивуванні з низькою щільністю нейрони гіпокампа експресують фармакологічно гетерогенну популяцію кальцієвих каналів; співвідношення каналів різних типів близьке до отриманого раніше на зрізах гіпокампа щурів.

Ключ. слова:
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522*715.7,025

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова:
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522*715.71*725.29натрій

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова:
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522*715.71*725.29кальцій

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Розглянуто механізми взаємодії похідних амідазол-4,5-, та піразол-3,4-дикарбонових кислот і нової бензопіранової сполуки, структурно подібної кумаринам рослинного походження - ансекуліна (КА-672) із NMDA-рецептор-керованим іонним каналом пірамідних нейронів щура. З використанням електрофізіологічних методів визначено дію даних сполук на провідність, керовану NMDA-рецепторами. Досліджено роль гідрофобних взаємодій у їх модуляції. Виявлено основні характеристики взаємодії КА-672 із рецепторами NMDA-типу. На підставі даних скринінгу піразольних та імідазольних похідних висловлено припущення про існування у глутамат-розпізнаючому центрі NMDA-рецептора ліпофільної ділянки, з якою може взаємодіяти ліпофільний замісник молекули похідної. Наявність такої взаємодії призводить до зміни і, навіть, інверсії агоністичних властивостей даної похідної. Досліджені речовини можуть бути прототипами для створення більш ефективних блокаторів NMDA-рецепторів, придатних для використання у клінічній медицині. КА-672 перебуває у другій фазі клінічних досліджень серед хворих на синдром Альцгеймера.

Уперше висвітлено процес транслокації гіпокальцину в живих нейронах культури гіпокампа, проаналізовано просторово-часові характеристики таких транслокацій. Уперше проведено одночасні досліди з вивчення переміщення гіпокальцину, вимірювання рівня внутрішньоклітинного кальцію та електрофізіологічних реєстрацій. Адаптовано для роботи з мікроскопією широкого поля кількісний метод вимірювання взаємодії між білками за допомогою FRET. Розроблено новий методичний підхід для вимірювання змін мембранної частини білка у живих клітинах у просторі та часі. Уперше показано вбудовування гіпокальцину саме у плазматичну мембрану. Розглянуто неоднорідність внутрішньої поверхні мембрани, що зумовлює нерівномірність вбудовування білка за транслокації. Уперше проведено кількісний аналіз просторово-часових транслокацій гіпокальцину та побудовано дифузійну модель поведінки гіпокальцину в дендритах нейронів.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522*715.7

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: РА433568 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Визначено роль протон-чутливих іонних каналів в електричній активності гіпокампа і поведінці щурів у експериментальній моделі індукованої епілепсії. Використовуючи антагоніст протон-чутливих іонних каналів 5b, вперше показано, що блокада провідності цих каналів має помітний антиепілептичний ефект у експерименті з епілептиформною активністю спричиненою каїнатом в клітинах зони CA1 гіпокампа in vivo. Виявлено, що блокування активності протон-чутливих іонних каналів призводить до зниження як домінуючої частоти тета-ритму, так і загального рівня локомоторної активності в тесті “відкрите поле”. Показано, що сполука 5b допомагає нормалізації зниженому рівню тривожності, а також істотно впливає на загальний рівень локомоторної активності у тварин з індукованою епілепсією в тесті “піднятий хрестоподібний лабіринт”. Фармакологічна блокада протон-чутливих іонних каналів у щурів значно відновлювала порушене внаслідок індукції епілепсії емоційне навчання, що зумовлене страхом.