Лактоферин є мультифункціональним протеїном, що синтезується різними тканинами організму та володіє антимікробною та імуномодуляторною активністю. Лактоферин відіграє провідну роль у підтриманні нормального функціонування ока. Мета роботи - одержати поліклональні антитіла до лактоферину людини для їх використання у визначенні вмісту лактоферину в слізній рідині, одержаної за норми та з очей з ушкодженою рогівкою. Фракцію імуноглобулінів G (IgG) було виділено з сироватки крові кролів, імунізованих лактоферином, за допомогою афінної хроматографії на протеїн A-сефарозі. Ступінь чистоти протеїну на кожній стадії очистки перевіряли за допомогою денатуруючого гель-електрофорезу (SDS-PAGE). Розпізнавання цільового антигену одержаними антитілами оцінювали за допомогою вестерн-блот аналізу з використанням розчину фракції IgG. Рівень лактоферину в слізній рідині, одержаної зі здорового ока (n = 4) та з ока пацієнтів з непроникаючим пошкодженням рогівки (n = 6), визначали імунохімічно з використанням одержаних антитіл. Результати визначення вмісту лактоферину в сльозі за умов норми та за травмування рогівки аналізували з використанням U-тесту Манна - Уітні. Міжгрупова різниця вважалася статистично достовірною за P << 0,05. Антитіла до лактоферину людини у вигляді фракції IgG було виділено на протеїн A-сефарозі з сироватки крові імунізованих кролів. Вестерн-блот аналізом було показано, що одержані антитіла розпізнають відповідний антиген як зону 75 kDa, яка відповідає за молекулярною масою інтактному поліпептиду лактоферину людини. Ту ж саму поліпептидну зону було визначено вестерн-блотом з підсиленою хемілюмінісцентною детекцією у зразках слізної рідини. Денситометричний аналіз поліпептиду 75 kDa надав змогу встановити, що вміст лактоферину в сльозі, зібраної в пацієнтів з непроникаючими травмами рогівки є у 3,2 разу нижчим за цей показник у нормі (P << 0,05). Крім того, слізна рідина пацієнтів з пошкодженнями рогівки у значних кількостях містила також імунореактивні продукти розщеплення лактоферину, а також високомолекулярні поліпептиди, які можуть відповідати комплексам лактоферину з іншими протеїнами, що утворюються за розвитку запальних процесів. Висновки: згідно з наведеними даними, одержані антитіла до лактоферину можуть бути використані як корисний інструмент для створення вдосконалених тестів та підходів для діагностики очних хвороб, пов'язаних з ушкодженням рогівки. Зниження вмісту лактоферину може слугувати прогностичним біомаркером перебігу ранового процесу в оці, зокрема, за непроникаючих травм рогівки, та є зручним до визначення у простий та неінвазійний спосіб.

 Наукова періодика України 

---

Додаткова інформація про автора(ів) публікації:
(cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці)

• Тихомиров Артем Олександрович (біологічні науки)
• Юсова Олена Іванівна (біологічні науки)
• Капустяненко Лада Григоріївна (біологічні науки)
• Білоус Валерій Юрійович (технічні науки)
• Білоус Віра Миколаївна (історичні науки)
• Білоус Віталій Арсентійович (1944–) (геологічні науки)

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"