Методами дифференциальной сканирующей микрокалориметрии (ДСМ) и кругового дихроизма (КД) исследована вторичная структура и свойства <$E alpha>-тромбина человека и его <$E gamma>-формы, образующейся при автолизе нативного фермента. По данным ДСМ в препаратах <$E alpha>-тромбина и <$E gamma>-формы тромбина наблюдается по одному пику температурного перехода при 58,5 и 53,3 <$E symbol Р>C соответственно, величины которых свидетельствуют о том, что <$E gamma>-форма является менее стабильной, чем исходный <$E alpha>-тромбин. В противоположность этому диизопропилфосфорил-<$E alpha>-тромбин (ДИФ-<$E alpha>-тромбин) обнаруживает два пика температурного перехода (57,5 и 64,5 <$E symbol Р>C). Данные КД показали, что превращение <$E alpha>-тромбина в <$E gamma>-форму слабо влияет на характер спектров КД и вторичную структуру препаратов фермента.

Исследование ингибиторного эффекта таких полианионов, как АТР и декстрансульфат (DS), на процесс свертывания фибриногена тромбином свидетельствует о том, что увеличение отрицательного заряда молекулы обусловливает рост ее ингибиторной активности. Найдено, что в присутствии каталитически неактивного ДИФ-<$E alpha>-тромбина, который содержит интактный анионсвязывающий центр (exosite 1), ингибиторная активность DS в отношении <$E alpha>-тромбина уменьшается, что объясняется способностью DS взаимодействовать с анионсвязывающим центром как <$E alpha>-тромбина, так и ДИФ-<$E alpha>-тромбина. В то же время ДИФ-<$E gamma>-тромбин - препарат с нарушенным анионсвязывающим центром - не влияет на ингибиторную активность DS, так как в этом случае DS не способен связываться с ДИФ-<$E gamma>-тромбином. В результате проведенных исследований показано, что молекула тромбина состоит из двух достаточно сильно взаимодействующих доменов, а анионсвязывающий дополнительный центр фермента (exosite 1) может играть первостепенную роль при взаимодействии тромбина с таким полианионом как DS.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е70*732.211

Рубрики:

Біологія людини

Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ 

---

Додаткова інформація про автора(ів) публікації:
(cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці)

• Кібірєв Володимир Костянтинович (1936–) (біологічні науки)

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"