Мета дослідження - розробка та валідація нової ензимної кінетико-фотометричної методики аналізу деквалінію хлориду, що грунтується на використанні реакції ферментного гідролізу ацетилхоліну, для визначення залишкових кількостей деквалінію хлориду під час здійснення контролю повноти очищення фармацевтичного обладнання. Встановлено оптимальні умови перебігу ензимної реакції і порядок змішування та концентрації ацетилхоліну (0,05 мг/мл), холінестерази (0,4 мг/мл), водню пероксиду (10 %) та п-фенетидину (1 %), час витримування реакційної суміші (20 хв), pH середовища (8,35), вплив природи буферного розчину. Проведено валідацію розробленої методики - запропоновано діапазон застосування методики (40 - 160 % в нормалізованих координатах, за 100 % обрано максимально допустиму концентрацію деквалінію хлориду в змивах з фармацевтичного обладнання <$Ex sub crit ~=~0,5> мкг/мл), кількість концентраційних рівнів (n = 7) та порядок їх розташування всередині діапазону застосування, з урахуванням чого розраховано максимально допустиму невизначеність методики (<$Emax DELTA sub x ~=~3,05> %) і, відповідно, критерії прийнятності параметрів лінійної залежності, систематичної та випадкової похибок. Показано, що валідаційні характеристики розробленої методики відповідають розрахованим критеріям прийнятності. Встановлено ступінь екстракції деквалінію хлориду зі свабу зі змивом з фармацевтичного обладнання. Визначення залишкових кількостей деквалінію хлориду на поверхні фармацевтичного обладнання визначали за ступенем інгібування ензимної реакції, який оцінювали за залишком субстрату біохімічної реакції - ацетилхоліну, що не прореагував. Визначення залишккової кількості ацетилхоліну реакційній суміші виконували за допомогою кінетико-фотометричного методу за індикаторною реакцією окиснення n-фенетидину надацетатною кислотою (утворюється під час допоміжної реакції пергідролізу у разі додавання до реакційної суміші надлишку водню пероксиду), реєструючи світлопоглинання утворюваного продукту реакції - азоксифенетолу (<$Elambda sub max ~=~358> нм) впродовж певного періоду часу. Висновки: розроблено ензимну кінетико-фотометричну методику визначення залишкових кількостей деквалінію хлориду на поверхні фармацевтичного обладнання після його очищення. Проведено валідацію розробленої методики за такими параметрами, як лінійність, правильність, прецизійність і межа кількісного визначення.

  Повний текст PDF - 970.095 Kb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"