Технологічні процеси хроматографічного очищення широко використовуються в останні роки для фракціонування плазми крові. Впровадження іонообмінної, афінної та гель-проникної хроматографії сприяли виникненню нового покоління високоочищених та вірус-безпечних терапевтичних препаратів плазми, зокрема факторів зсідання крові. Мета дослідження - дослідити можливість використання методу хроматографічного очищення фактора VIII на кремнеземних сорбентах з тріазиновими барвниками в якості лігандів. Наведено результати досліджень очищення фактора VIII зсідання крові, яке є комбінацією попереднього фракціонування свіжозамороженої плазми з наступним етапом методу афінної хроматографії на макропористих кремнеземних сорбентах. Охарактеризовано основні переваги і недоліки використання тріазинових барвників в ролі афінних лігандів. Запропонований метод охоплює попереднє осадження білків плазми цитратом барію, адсорбцію на гідроксиді алюмінію, відділення осаджених білків центрифугуванням і використання методу негативної афінної хроматографії на кремнеземних сорбентах: діасорб-активний яскраво-голубий К, діасорб-активний пурпуровий 4ЖТ, діасорб-Procion Blue HB, діасорб-Procion Gelb MXR. Продемонстровано, що поєднання попереднього фракціонування плазми крові з методом негативної афінної хроматографії на макропористих кремнеземних сорбентах із синтетичними барвниками як лігандів надає змогу досягти високого ступеня очищення фактора VIII (приблизно в 100 разів). Наприклад, використання сорбенту діасорб-активний пурпуровий 4ЖТ збільшує питому активність фактора VIII з 0,017 +- 0,004 МО/мг до 1,940 +- 0,023 МО/мг білка. Наведена технологія може бути застосована одночасно з іншими видами хроматографії у схемі препаративного одержання фактора VIII зсідання крові.

  Повний текст PDF - 520.172 Kb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"