Специфічність приклітинних протеїназ лактококів по відношенню до казеїнових фракцій відіграє важливу роль у формуванні показників якості ферментованих молочних продуктів, а також в утворенні природних біологічно активних пептидів казеїнового походження. Існуючі методи встановлення специфічності цих ензимів базуються на довготривалому вирощуванні лактококів у молочному середовищі або складному виділенні й ідентифікації приклітинних протеїназ. Мета роботи - визначення специфічності приклітинних протеїназ лактококів з використанням як субстрату гомогенних казеїнових фракцій. Фракції <$Ealpha sub S1>-, beta- і kappa-казеїнів виділяли диференційним осадженням в ізоелектричній точці за присутності сечовини і препаративним електрофорезом у поліакриламідному гелі. Для визначення загальної протеолітичної активності та відбору протеїназо-позитивних штамів проведено їх короткотермінове вирощування (12 год) у стерильному знежиреному молоці за <$E30~symbol Р roman C>. У випадку розвитку протеїназо-позитивних штамів концентрація продуктів протеолізу через 12 год культивування залишається незмінною або збільшується. Це залежить від активності та кількості приклітинної протеїнази. Проведено тестування штамів на здатність утворювати молочну кислоту та коагулювати казеїни молока. Ці характеристики є одними з найважливіших у молочнокислих бактерій і тісно пов'язані з протеолітичною активністю. Для проведення протеолізу використовували протеїназо-позитивні клітини лактококів, вирощені у молочному середовищі. Клітини відмивали від компонентів середовища і концентрували за умов збереження їх приклітинних протеїназ. Специфічність приклітинних протеїназ лактококів встановлювали на основі електрофоретичного аналізу нерозщеплених казеїнових субстратів у лужній системі однорідного поліакриламідного гелю. В результаті проведеного аналізу визначено тип приклітинних протеїназ 4-х штамів L. lactis ssp. lactis. Запропонований метод надає змогу значно скоротити тривалість аналізу та встановити специфічність і тип приклітинної протеїнази лактококів.

  Повний текст PDF - 980.659 Kb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"