Trpm8 - це неселективний катіонний Ca<^>2+-проникний іонний канал, що активується зниженням температури до 28 <$E symbol Р>C та речовинами, що імітують холодове відчуття, зокрема, ментолом та іциліном. Trpm8 експресується у сенсорних нейронах, де його функція полягає в передачі температурних відчуттів, проте Trpm8 також експресується у внутрішніх органах, де температура тіла стабільно висока та не опускається нижче за 36 <$E symbol Р>C, що є набагато вищим за температуру активації Trpm8 каналу. Це надає підстави припустити, що Trpm8 може виконувати інші, крім терморегулюючих, функції, зокрема, брати участь у ноцицепції. мРНК Trpm8 експресується у сім'явивідних протоках - порожнистому м'язовому органі чоловічої статевої системи. Проте в попередніх роботах, у міоцитах сім'явивідних протоків не було встановлено наявності струмів, характерних для Trpm8. Сім'явивідні протоки розташовані поза яєчками та складаються з гладеньком'язової тканини й епітеліального шару. Ці протоки активно скорочуються і транспортують сперму від яєчок до сім'явипорскувальних проток перед еякуляцією. Оскільки температура у сім'явивідних протоках стабільно висока, роль Trpm8, імовірно, полягає не в температурочутливості. Мета дослідження - проаналізувати експресію мРНК та білка Trpm8 у сім'явивідних протоках щурів і провести аналіз сплайс-варіантів цього транскрипту. Експресія гена Trpm8 була підтверджена на рівні мРНК, а Trpm8 білок виявлений за допомогою Western-блот аналізу. У тканині сім'явивідних протоків було виявлено коротші порівняно з класичною ізоформою Trpm8 мРНК і білок поряд із канонічною ізоформою. Ізольовано окремі гладеньком'язові клітини зі сім'явивідних проток і провели багатоклітинну полімеразну ланцюгову реакцію. Такий методичний підхід надає змогу позбутися забруднення зразків тканини неміоцитною мРНК, яка може потрапити у тканину, зокрема, з терміналей сенсорних нейронів, де Trpm8 експресується на високому рівні. Цікаво те, що в ізольованих міоцитах не встановлено наявності класичної Trpm8 мРНК, проте була наявна неканонічна ізоформа каналу. Припущено, що коротша ізоформа формується внаслідок альтернативного сплайсингу, і цим можна пояснити різницю функціонування Trpm8 у сім'явивідних протоках, а саме відсутність струмів, характерних для каналу Trpm8. Коротша ізоформа може мати вкорочений N-кінцевий домен білка Trpm8, що відповідає відомим білковим ізоформам Trpm8 у людини sM8-6 та sM8-18.

  Повний текст PDF - 1.716 Mb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"