Отмечено, что эффективное криоконсервирование клеточных суспензий является важной задачей криобиологии. На основании предыдущих исследований разработана методика системной оптимизации протоколов криоконсервирования клеточных суспензий. В качестве клеточной модели использованы кератиноциты человека. Исследование включало 48 протоколов с различными скоростями охлаждения (В) в двухступенчатых режимах (В1 в диапазоне от 4 до -30 и В2 от -30 до -80 градусов по Цельсию). Все протоколы изучены при четырех различных концентрациях наиболее часто применяемого криопротектора диметилсульфоксида (ДМСО). Растровый анализ около 600 образцов позволил изучить полный набор возможных переменных. В дальнейших исследованиях данная методика использована для улучшения протоколов криоконсервирования HPMEC-ST1.6R (легочные микрососудистые эндотелиальные клетки человека). Результаты исследования показали, что только определенное оптимальное сочетание скоростей охлаждения обеспечивает высокий уровень выживаемости клеток после оттаивания. Для кератиноцитов человека оптимальными протоколами замораживания были: охлаждение со скоростью 5 К/мин для В1 и 7,5 К/мин для В2, либо 5 К/мин для В1 и 10 К/мин для В2 при концентрации ДМСО 2,5 %. Наиболее высокие показатели выживаемости культуры клеток HPMEC-ST1.6R были достигнуты при использовании следующих протоколов: 5 К/мин (В1) в сочетании с 5 К/мин (В2) (7,5 % ДМСО); 3 К/мин в сочетании с 3 К/мин (5 или 7,5 % ДМСО); 10 К/мин (В1) в сочетании с 3 К/мин (В2) (10 % ДМСО).

  Повний текст PDF - 606.878 Kb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"