Криоконсервирование плазмидных штаммов бактерий семейства Enterobacteriaceae

Панасенко, Ю. В.; Высеканцев, И. П.; Бирюкова, С. В.

Цель - изучение влияния условий криоконсервирования и хранения при температуре жидкого азота на плазмидные штаммы бактерий Escherichia coli. Установлено, что замораживание образцов бактерий, суспендированных только в мясо-пептонном бульоне (МПБ), со скоростью 2 - 10 <$E symbol Р>C/мин до -70 <$E symbol Р>C с последующим погружением в жидкий азот не приводило к достоверной гибели бактериальных клеток. Замораживание погружением криопробирок непосредственно в жидкий азот вызывало снижение количества КОЕ/мл до 65 - 70 %. Добавление в МПБ указанных выше криопротекторов обеспечивало сохранность количества жизнеспособных бактерий на исходном уровне при низких и высоких скоростях охлаждения. Состав среды криоконсервирования и режим охлаждения не влияли на сохранность плазмид в бактериальных клетках. Все бактериальные клетки, помимо сохранности в них плазмид, сохраняли также генетически детерминированные ферментативные свойства, используемые для идентификации бактерий этого семейства: способность ферментировать глюкозу и другие сахара и спирты, гидролизировать мочевину, утилизировать цитрат и ацетат, декарбоксилировать аминокислоты, а также нитратные свойства (восстановление нитратов в нитриты) и образование ацетилметилкарбинола (в реакции Фогеса - Проскауэра) и 2,3-бутиленгликоля (в реакции с метиловым красным) [1].


	Наукова періодика України		Проблеми кріобіології і кріомедицини