Доведено можливість дослідження функціонування електронтранспортувального ланцюга (ЕТЛ) в ізольованих мітохондріях гладенького м'яза матки щурів за використання власної флуоресценції коензимів NADH і FAD. Виявлено протилежно спрямовані зміни флуоресцентних сигналів від FAD і NADH за нормального функціонування ЕТЛ мітохондрій. Спрямований вплив інгібіторів комплексів I, III та IV змінював флуоресценцію аденінових нуклеотидів. Ротенон (5 мкМ) спричинював різке зростання флуоресценції NADH внаслідок інгібування комплексу I і не змінював динаміку росту флуоресценції від FAD. Антиміцин A (1 мкг/мл; інгібітор комплексу III) призводив до різкого зростання флуоресценції NADH і помірного зростання її у FAD у порівнянні з контролем. Інгібітор IV комплексу NaN3 (5 мМ) і протонофор СССР (10 мкМ) знижували флуоресценцію від NADH і FAD. Крім того, всі вищезазначені інгібітори спричинювали набухання мітохондрій. Донори NO - (0,1 мМ нітропрусид і нітрит натрію) знижували флуоресценцію NADH і FAD подібно до змін флуоресценції за дії азиду натрію. Енергозалежна акумуляція Ca<^>2+ в матрикс мітохондрій за присутності субстратів окиснення та комплексу Mg-ATP<^>2- супроводжувалась різким зниженням флуоресценції NADH і FAD із подальшим ростом флуоресценції досліджуваних нуклеотидів, що, можливо, відбувається переважно за рахунок Ca<^>2+-залежної активації дегідрогеназ циклу Кребса. Отже, флуоресцентний сигнал від FAD і NADH відображає зміни окисно-відновного стану зазначених нуклеотидів в ізольованих мітохондріях, що можна використати для оцінки впливу ефекторів функціонування ЕТЛ.

  Повний текст PDF - 2.942 Mb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"