Наукова періодика України Ukrainian Biochemical Journal


Merlavsky V. M. 
Experimental substantiation of permeabilized hepatocytes model for investigation of mitochondria in situ respiration / V. M. Merlavsky, B. O. Manko, O. V. Ikkert, V. V. Manko // The Ukrainian Biochemical Journal. - 2015. - Vol. 87, № 6. - С. 113-121. - Режим доступу: http://nbuv.gov.ua/UJRN/BioChem_2015_87_6_13
Для експериментального обгрунтування моделі пермеабілізованих гепатоцитів щурів оцінено ступінь пермеабілізації клітин, використовуючи трипановий тест та їх швидкість дихання, яку визначено за допомогою полярографічного методу за окиснення ендогенних субстратів - сукцинату (0,35 мМ) і alpha-кетоглутарату (1 мМ). Окисне фосфорилювання стимулювали ADP (750 мкМ). Ступінь пермеабілізації гепатоцитів дигітоніном залежить як від його концентрації у середовищі, так і кількості клітин у суспензії. За 0,9 - 1,7 млн клітин в одному мл суспензії повна пермеабілізація відбувалась за концентрації 25 мкг/мл дигітоніну, за 2,0 - 3,0 млн клітин - 50 мкг/мл дигітоніну, а за 4,0 - 5,6 млн клітин - 100 мкг/мл дигітоніну. Отже, чим більшою є густина суспензії клітин, тим більшою має бути концентрація дигітоніну. Обробка гепатоцитів дигітоніном знижувала швидкість ендогенного дихання, яка досягала мінімуму теж за 20 - 22 мкг дигітоніну на один млн клітин. Додавання до пермеабілізованих гепатоцитів alpha-кетоглутарату підтримувало показники дихання на стабільному рівні, вищому за рівень ендогенного дихання за відповідної концентрації дигітоніну, але не інтактних клітин. За одночасного внесення alpha-кетоглутарату та ADP швидкість дихання пермеабілізованих гепатоцитів збільшувалась до рівня ендогенного дихання інтактних клітин незалежно від концентрації дигітоніну. Внесення у комірку лише сукцинату та особливо сукцинату за наявності ADP значно активувало дихання пермеабілізованих гепатоцитів, яке перевищувало рівень ендогенного дихання інтактних клітин. Залежність швидкості сукцинатстимульованого дихання від концентрації дигітоніну досягала максимуму за 20 - 22 мкг дигітоніну у розрахунку на один млн клітин. Передбачається, що оптимальне співвідношення між кількістю дигітоніну і кількістю клітин у суспензії для різних тканин відрізняється.
  Повний текст PDF - 2.109 Mb    Зміст випуску     Цитування публікації

Цитованість авторів публікації:
  • Merlavsky V.
  • Manko B.
  • Ikkert O.
  • Manko V.

  • Бібліографічний опис для цитування:

    Merlavsky V. M. Experimental substantiation of permeabilized hepatocytes model for investigation of mitochondria in situ respiration / V. M. Merlavsky, B. O. Manko, O. V. Ikkert, V. V. Manko // The Ukrainian Biochemical Journal. - 2015. - Vol. 87, № 6. - С. 113-121. - Режим доступу: http://nbuv.gov.ua/UJRN/BioChem_2015_87_6_13.

    Додаткова інформація про автора(ів) публікації:
    (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці)
  • Манько Володимир Васильович (1969–) (біологічні науки)
  •   Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
     
    Відділ інформаційно-комунікаційних технологій
    Пам`ятка користувача

    Всі права захищені © Національна бібліотека України імені В. І. Вернадського