Із свіжозібраних базидіом Lactarius pergamenus Fr. (Fr.) за допомогою методів іонообмінної хроматографії з використанням DEAE-toyopearl, КМ-целюлози та препаративного електрофорезу в 7,5 %-му поліакриламідному гелі (ПААГ) (pH 8,6) виявлено 3, з яких очищено дві ізоформи поліфенолоксидази (ПФО) (1-1 і 1-2) з виходом за протеїном відповідно 0,42 і 0,15 мг/кг базидіом. За диск-електрофорезу в 7,5 %-му ПААГ за pH 8,6 ізоформи відрізняються рухливістю. Питома активність ізоформи 1-2 у 4,8 разу є вищою за активність ізоформи 1-1. Молекулярна маса, визначена гель-хроматографією на Toyopearl HW-55 ізоформ 1-1 і 1-2 була однаковою і становила 64 +- 2 кДа. Електрофорез у 15 %-му ПААГ за присутності додецилсульфату натрію і beta-меркаптоетанолу виявив одну зону з Мм 64 +- 1 кДа, що свідчить про наявність одного поліпептидного ланцюга у молекулі ензиму. Найвищу активність ензим виявляв за pH 6,0 і 10 <^>oC, а за 70 <^>oC відбувається інактивація ензиму. Активність поліфенолоксидази є найвищою в молодих грибів і знижується з їх віком, позитивно корелюючи з вмістом у них молочного соку. Орто-амінофенол виявився найефективнішим серед усіх випробуваних субстратів за визначення активності ПФО (о-, м- і п-амінофеноли, пірокатехін, тирозин, резорцин, флороглюцин) і його відносна активність становила 129 % від активності пірокатехіну. Найефективнішим інгібітором активності ПФО була аскорбінова кислота, яка повністю блокувала активність у концентрації 1 мМ, тоді як за присутності такої самої концентрації сульфіту натрію та тіосечовини активність ензиму знижувалась лише на 40 - 45 %. ПФО в базидіомах гриба L. pergamenus переважно локалізована у молочному соці гриба, де її висока активність може бути пов'язана з участю у захисті базидіом від патогенів.

  Повний текст PDF - 1.572 Mb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"