Мета роботи - одержання рекомбінантного білка A Staphylococcus aureus із залишком цистеїну (SPA-Cys) та його застосування для афінної хроматографії та формування біоселективного елемента імуносенсора. За допомогою генно-інженерних методів конструювали та експресували в E. coli послідовність ДНК, яка кодує 5 IgG-зв'язувальних доменів SPA, His-таг і цистеїн. Одержаний рекомбінантний білок SPA-Cys іммобілізували на малеїмі-дактивованих мікрогранулах силікагелю для приготування біоафінного сорбенту та на золотій сенсорній поверхні для розробки імуносенсора. Шляхом синтезу у E. coli одержано білок SPA-Cys в розчинній формі з високим виходом. Очищений рекомбінантний білок A має високу IgG-зв'язувальну активність. Ємність біоафінного сорбенту з іммобілізованим SPA-Cys складала 10 - 12 мг IgG/мл. Одностадійна процедура афінної хроматографії сироватки крові надає змогу одержувати IgG з чистотою більш ніж 95 %. Показано, що біоселективний елемент імуносенсора, сформований на основі SPA-Cys, вибірково взаємодіє з IgG людини і не взаємодіє з контрольними білками. Висновки: рекомбінантний білок SPA-Cys був успішно використаний для приготування стаціонарної фази афінної хроматографії та формування біоселективного елемента імуносенсора.

  Повний текст PDF - 287.669 Kb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"