Об'єкти дослідження – трава, листки, стебла, кореневища з коренями підлісника європейського, екстракти, індивідуальні БАР, умови зростання рослини; мета – фармакогностичне дослідження підлісника європейського та встановлення можливості створення лікарських засобів на основі БАР досліджуваної сировини; методи – морфолого-анатомічні та органолептичні, ресурсознавчі, фізичні, фізико-хімічні, хімічні, технологічні, токсикологічні, фармакологічні, мікробіологічні, статистичні; новизна – встановлено наявність основних груп БАР; визначено кількісний вміст окиснюваних фенолів, суми поліфенолів, танінів, флавоноїдів, тритерпенових сапонінів, гідроксикоричних та органічних кислот, в тому числі кислоти аскорбінової, вітаміну К1; вперше виділено та встановлено кількісний вміст фракцій водорозчинних полісахаридів (ВРПС), пектинових речовин (ПР), геміцелюлози А (ГцА) та геміцелюлози Б (ГцБ) у траві та кореневищах з коренями підлісника європейського; встановлено їх мономерний склад; вперше у траві підлісника європейського ідентифіковано 10 фенольних сполук: 6 метаболітів таніну – галокатехін, катехін, епікатехін, катехіну галат, епікатехіну галат, елагову кислоту; 2 флавоноїди – кемферол, апігенін; кумарин; ферулову кислоту; 3 сполуки стероїдної природи – β-ситостерол, стигмастан-3,5-дієн, стигмастерол; у складі ефірної олії 13 компонентів летких сполук – β-патчулен, β-кедрен, транс-α-бергамотен, β-хелміскапен, α-кадінен, α-муурулен, бісаболен, (-)-каламенен, 1-метил-6-метиленбіцикло[3.2.0] гептан, гептакозан, 4,11-селінадієн, гексагідро-фарнезил-ацетон; жирні кислоти – пальмітолеїнову, пальмітинову, лінолеву, ліноленову, стеаринову, бегенову, трикозанову, лігноцеринову, церотинову; амінокислоти – треонін, валін, метіонін, ізолейцин, лейцин, фенілаланін, лізин, гістидин, аспарагінову та глутамінову кислоти, серин, пролін, цистин, гліцин, аланін, тирозин, аргінін; в кореневищах з коренями вперше виявлено 11 фенольних сполук: 7 метаболітів таніну – галову та елагову кислоти, галокатехін, епігалокатехін, катехін, епікатехін, епікатехіну галат; апігенін; кумарин; 2 гідроксикоричні кислоти – кофейну, ферулову; амінокислоти – треонін, валін, метіонін, ізолейцин, лейцин, фенілаланін, лізин, гістидин, аспарагінова та глутамінова кислоти, серин, пролін, цистин, гліцин, аланін, тирозин, аргінін; вперше методом рідинно-рідинного фракціонування, хроматографії на колонках силікагелю, препаративної хроматографії на папері, дробної кристалізації з трави підлісника європейського виділено в індивідуальному стані 6 гідроксикоричних кислот (кофейну, хлорогенову, неохлорогенову, розмаринову, ферулову, n-кумарову) та 1 флавоноїд (рутин); з підземних органів п. європейського – 5 гідроксикоричних кислот (кофейну, хлорогенову, неохлорогенову, розмаринову, ферулову); вперше досліджено елементний склад трави та кореневищ з коренями підлісника європейського; вперше встановлено морфолого-анатомічні діагностичні ознаки сировини підлісника європейського, числові показники доброякісності трави підлісника європейського, які використано для ідентифікації та стандартизації рослинної сировини; виявлено місця зростання рослини на території Івано-Франківської та Чернівецької областей; вперше визначено запаси сировини підлісника європейського на Прикарпатті; на основі проведених фенологічних та агротехнічних досліджень встановлено можливість культивування підлісника європейського в умовах Прикарпаття; новизну досліджень підтверджено та захищено патентом України на корисну модель № 132069 «Спосіб одержання екстракту з трави підлісника європейського з кровоспинною дією»; результати – отримані результати фармакогностичного дослідження вказують на можливість використання сировини підлісника європейського як перспективного джерела БАР з кровоспинними та ранозагоювальними властивостями; досліджено параметри екстракції БАР, отримано 4 сухі екстракти з сировини підлісника європейського; доведено можливість використання екстрактів трави підлісника європейського як лікарських засобів з кровоспинною, ранозагоювальною, протизапальною та антимікробною дією; розроблено проєкти методів контролю якості (МКЯ) «Підлісника європейського трава», «Підлісника європейського трави екстракт сухий» та «Інструкцію із заготівлі та сушіння трави підлісника європейського»; впроваджено – за матеріалами дисертаційної роботи видано монографію «Перспективи використання підлісника європейського (Sanicula europea L.) та астранції великої (Astrantia major L.) в медицині та фармації», яку разом з іншими результатами досліджень впроваджено в навчальний процес закладів вищої освіти та практичну роботу; галузь – фармація.^UObjects of research – herb, leaves, stems, rhizomes with roots of Sanicula europaea L., extracts, individual biologically active substances, plant growth conditions; aim – pharmacognostic study of Sanicula europaea L. and establishing the possibility of developing the drugs based on biologically active substances of the studied raw materials; methods – morphological, anatomical and organoleptic, resource studies, physical, physico-chemical, chemical, technological, toxicological, pharmacological, microbiological, statistical; novelty – the presence of the main groups of biologically active substances was established; the content of oxidizable phenols, the sum of polyphenols, tannins, flavonoids, triterpene saponins, hydroxycinnamic and organic acids, including ascorbic acid, vitamin K1 was studied; for the first time the content of fractions of water-soluble polysaccharides, pectic substances, hemicellulose A and hemicellulose B in herb and rhizomes with roots of Sanicula europaea L. were isolated and established; their monomeric composition was established; for the first time 10 phenolic compounds were identified in Sanicula europaea L.herb: 6 metabolites of tannin – gallocatechin, catechin, epicatechin, catechin gallate, epicatechin gallate, ellagic acid; 2 flavonoids – kaempferol, apigenin; coumarin; ferulic acid; 3 steroids – β-sitosterol, stigmastan-3,5-diene, stigmasterol; in the essential oil 13 components of volatile compounds – β-patchulene, β-cedrene, trans-α-bergamotene, β-helmiscapen, α-cadinene, α-murulene, bisabolen, (-)-calamenene, caryophyllene oxide, 1-methyl-6-methylenebicyclo[3.2.0] heptane, heptacosane, 4,11-selinadiene, hexahydrofarnesyl acetone; fatty acids – palmitoleic, palmitic, linoleic, linolenic, stearic, behenic, tricosanic, lignoceric, cerotic; amino acids – threonine, valine, methionine, isoleucine, leucine, phenylalanine, lysine, histidine, aspartic and glutamic acid, serine, proline, cystine, glycine, alanine, tyrosine, arginine; 11 phenolic compounds were detected for the first time in rhizomes with roots: 7 metabolites of tannin – gallic and ellagic acids, gallocatechin, epigallocatechin, catechin, epicatechin, epicatechin gallate; apigenin; coumarin; 2 hydroxycinnamic acids – caffeic, ferulic; amino acids – threonine, valine, methionine, isoleucine, leucine, phenylalanine, lysine, histidine, aspartic and glutamic acids, serine, proline, cystine, glycine, alanine, tyrosine, arginine; for the first time by the method of liquid-liquid fractionation, chromatography on silica gel columns, preparative chromatography on paper, fractional crystallization from the Sanicula europaea L. herb, 6 hydroxycinnamic acids (caffeic, chlorogenic, neochlorogenic, rosemary, ferulic, p-coumaric); from the underground organs of the Sanicula europaea L. – 5 hydroxycinnamic acids (caffeic, chlorogenic, neochlorogenic, rosemary, ferulic); for the first time the elemental composition of herb and rhizomes with roots of Sanicula europaea L. was studied; for the first time morphological and anatomical diagnostic signs of European undergrowth raw material, numerical indicators of Sanicula europaea L. herb, which were used for identification and standardization of plant raw materials, were established; the places of plant growth on the territory of Ivano-Frankivsk and Chernivtsi regions were revealed; for the first time the stocks of raw materials of Sanicula europaea L. in Precarpathian region were determined; on the basis of the conducted phenological and agrotechnical researches the possibility of cultivation of Sanicula europaea L. in the conditions of Precarpathian region is established; the novelty of the research was confirmed and protected by the patent of Ukraine for a utility model № 132069 "Method of obtaining the extract from the herb of Sanicula europaea L. with hemostatic activity"; results – the obtained results of pharmacognostic research indicate the possibility of using the raw material of Sanicula europaea L. as a promising source of biologically active substances with hemostatic and wound-healing properties; the parameters of biologically active substances' extraction were investigated, 4 dry extracts from Sanicula europaea L. raw materials were obtained; the possibility of using extracts of Sanicula europaea L. herb as medicines with hemostatic, wound-healing, anti-inflammatory and antimicrobial action was proved; the projects of methods of quality control “Sanicula europaea L. herb”, “Dry extract from Sanicula europaea L. herb” and “Instruction for harvesting and drying of Sanicula europaea L. herb” were developed; introduced – based on the materials of the dissertation the monograph "Prospects for the use of Sanicula europea L. and Astrantia major L. in medicine and pharmacy" was published and along with other research results it was introduced into the educational process of higher education establishments and in the practical work ; branch – pharmacy.

Цукровий діабет (ЦД) й досі залишається однією з найактуальніших медико-соціальних проблем суспільства, адже належить до 10 найпоширеніших захворювань в усьому світі і призводить до ураження багатьох систем та органів. З огляду на це, пошук препаратів, що характеризуються не лише гіпоглікемічними властивостями, але й здатні зменшувати негативний вплив оксидативного стресу є важливим у терапії ЦД. Тому, отримання екстрактів плодів дерену справжнього та вивчення їх біологічних властивостей дасть змогу оцінити перспективу використання екстрактів як можливих препаратів для терапії діабету. У результаті аналізу якісного та кількісного складу отриманих екстрактів червоних і жовтих плодів дерену справжнього виявлено 29 основних сполук з двох груп: 8 іридоїдів і 21 фенольна сполука, зокрема антоціани, фенольні кислоти та флавоноли. Водночас, встановлено, що антоціани та похідні кемпферолу були ідентифіковані виключно в екстракті червоних плодів дерену справжнього. Виявлено, що вміст логанової кислоти у складі обох екстрактів є найвищим серед усіх ідентифікованих сполук та зокрема групи іридоїдів і тому, логанову кислоту екстрагували з жовтих плодів дерену справжнього і досліджували як окремий екстракт. Встановлено цукрознижувальний ефект екстрактів червоних і жовтих плодів дерену справжнього у щурів зі стрептозотоцин-індукованим діабетом за введення у дозі 20 мг/кг маси тіла впродовж 14 днів, на що вказують зниження концентрації глюкози та інтегрального показника площі під глікемічними кривими. Екстракт логанової кислоти не проявляв гіпоглікемічного ефекту. Виявлено інгібувальний ефект усіх досліджуваних екстрактів плодів дерену справжнього на активність -глюкозидази Saccharomyces сerevisiae. Водночас, доведено, що екстракти жовтих і червоних плодів проявляли змішаний, а логанова кислота – неконкурентний тип інгібування -глюкозидази, що може пояснити різницю в ефективності впливу екстрактів на активність ензиму in vitro та їх гіпоглікемічний ефект in vivo. З'ясовано, що екстракти плодів дерену справжнього сприяли приросту маси тіла у щурів з експериментальним ЦД. Також виявлено, що екстракти червоних і жовтих плодів сприяли збільшенню популяції еритроцитів із підвищеною стійкістю до кислотного гемолітика, водночас, введення логанової кислоти не зумовлювало позитивних змін, а розподіл еритроцитів за віковими популяціями продемонстрував збільшення клітин зі зниженою резистентністю. У результаті дослідження in vitro антиоксидантних властивостей екстрактів червоних і жовтих плодів Cornus mas L. на моделі мембран ліпосом з фосфатидилхоліну курячого яйця продемонстровано здатність обох екстрактів захищати ліпідну мембрану від вільних радикалів, індукованих хімічними та фізичними чинниками. Досліджено також in vivo антиоксидантні властивості екстрактів плодів Cornus mas L. та вперше встановлено їх вплив на про/антиоксидантний статус лейкоцитів периферичної крові щурів за ЦД. Виявлено, що досліджувані екстракти обумовлювали зниження рівня АФО, зменшенні інтенсивності процесів окисної модифікації білків і перекисного окиснення ліпідів в плазмі і лейкоцитах, а також сприяє підвищенню активності окремих ферментів антиоксидантної системи захисту в лейкоцитах крові тварин з ЦД. Підтверджено зв'язок МПО з розвитком оксидативного стресу за діабету, що виявлялося у зростанні рівня ще одного біомаркера окисного пошкодження протеїнів – кінцевих продуктів оксидації (AOPPs) в плазмі крові. З'ясовано, що екстракти червоних і жовтих плодів дерену сприяли зростанню активності МПО і рівня AOPPs у лейкоцитах, а екстракт логанової кислоти впливав лише на вміст кінцевих продуктів оксидації. Введення екстрактів червоних і жовтих плодів теж сприяло зниженню обох показників в плазмі крові, натомість логанова кислота проявляла свій ефект лише на активність МПО. Застосування екстрактів червоних і жовтих плодів дерену справжнього тваринам з ЦД зумовлювало зниження у плазмі вмісту кінцевих продуктів глікації (англ. AGEs), проте лише екстракт червоних плодів дерену спричиняв зниження рецепторів до них (RAGE), експонованих на мембрані лейкоцитів і розчинних у плазмі крові, що зумовлено гіпоглікемічними й антиоксидантними властивостями цього екстракту. Проаналізовано причини зниження активності ензимів антиоксидантного захисту та виникнення функціональних порушень у лейкоцитах за діабету. Встановлено зменшення поглинання флюоресцентно-міченого аналога глюкози лейкоцитами за експериментального цукрового діабету порівняно з контрольними показниками. Водночас виявлено зниження рівня АТФ в лейкоцитах крові щурів з діабетом. Введення екстрактів плодів дерену справжнього та логанової кислоти сприяло зростанню поглинання глюкози лейкоцитами та супутньому підвищенню рівня АТФ у цих клітинах.^UDiabetes mellitus (DM) is still one of the most pressing medical and social problems in society, as it belongs to the 10 most common diseases in the world and affects many systems and organs. Considering this, the search for drugs that are characterized not only by hypoglycemic properties, but also able to reduce the negative effects of oxidative stress is important in the treatment of DM. Therefore, obtaining extracts of Cornus mas L. fruits and studying their biological properties will allow us to assess the prospects of using the extracts as possible drugs for the diabetes treatment. The qualitative and quantitative composition of red and yellow fruits extracts of Cornus mas L. was analyzed, 29 compounds from two main groups were found: 8 iridoids and 21 phenolic compounds, in particular anthocyanins, phenolic acids and flavonols. At the same time, it was found that anthocyanins and kaempferol derivatives were identified exclusively in the red fruit extract of cornelian cherry. It was found that the content of loganic acid in both extracts is the highest among all identified compounds and in particular the iridoids. Therefore, loganic acid was extracted from the yellow fruits of cornelian cherry and was studied as a separate extract. The hypoglycemic effect of red and yellow fruit extracts of cornelian cherry was found under administration at a dose of 20 mg/kg body weight for 14 days to rats with streptozotocin-induced diabetes, evidenced by a decrease in glucose concentration and integral area under glycemic curves. Loganic acid did not improve blood glucose level. The inhibitory effect of all cornelian cherry extracts on the -glucosidase Saccharomyces cerevisiae was revealed. At the same time, yellow and red fruit extracts possess mixed type and loganic acid has non-competitive type of -glucosidase inhibition. These results may explain the difference in the extracts efficacy on enzyme activity in vitro and their hypoglycemic potential in vivo. Extracts of cornelian cherry fruit were found to increase body weight in rats with DM. It was also revealed that extracts of red and yellow fruits contributed to an increase in the population of erythrocytes with increased resistance to acid hemolytic. At the same time, administration of loganic acid did not cause positive changes and led to an increase in cells with reduced resistance. An in vitro study of the antioxidant properties of Cornus mas L. red and yellow fruit extracts in a model of phosphatidylcholine liposome demonstrated the ability of both extracts to protect the lipid membrane from free radicals induced by chemical and physical factors. The in vivo antioxidant properties of Cornus mas L. fruit extracts were also studied and their effect on pro/antioxidant status of peripheral blood leukocytes of rats in diabetes was established for the first time. It was found that the studied extracts caused a decrease in the level of ROS, were reducing the intensity of oxidative modification of proteins and lipid peroxidation in plasma and leukocytes and led to increase the activity of some antioxidant enzyme in blood leukocytes of animals with diabetes. Relation between MPO and development of oxidative stress in diabetes, which was manifested by an increase in the level of another biomarker of oxidative damage of proteins – advanced oxidation protein products (AOPPs) in blood plasma, has been confirmed. Extracts of red and yellow fruits of Cornus mas L. were found to increase the activity of MPO and the level of AOPPs in leukocytes, and loganic acid affected only the content of AOPPs. It was shown that administration of extracts of red and yellow fruits also contributed to the reduction of both indicators in blood plasma, while loganic acid led only to the decrease in the activity of MPO. It was found that the extract of red and yellow fruits of cornelian cherry caused a decrease in plasma glycation end products (AGEs) in animals with DM. Only red fruit extract caused a decrease in their receptors (RAGE) on the membrane of leukocytes and soluble form in plasma due to hypoglycemic and antioxidant properties of this extract. It was analyzed as the reasons for decrease in the activity of antioxidant enzymes and leukocytes' functional disorders development in the condition of diabetes. A reduced uptake of fluorescently labeled glucose analogue by leukocytes under experimental diabetes mellitus was found compared to control values. At the same time, a decrease in the level of ATP in blood leukocytes of rats with diabetes was established. Administration of cornelian cherry red and yellow fruit extracts and loganic acid contributed to the increase in glucose uptake by leukocytes and the concomitant increase in intracellular ATP levels.

Дисертаційна робота присвячена вивченню мильнянки лікарської та чорнобривців золотистих, які, згідно з джерелами літератури, використовують у традиційній медицині як сечогінні засоби. Проведено комплексне фармакогностичне вивчення мильнянки лікарської трави і коренів та чорнобривців золотистих трави. У досліджуваній сировині встановлено наявність та визначено кількісний вміст вуглеводів, карбонових та амінокислот, летких сполук, сапонінів, сполук фенольної природи – гідроксикоричних кислот, флавоноїдів, дубильних речовин, а також визначено їх мінеральний склад. У мильнянки лікарської траві і коренях та у чорнобривців золотистих траві досліджено полісахаридні комплекси, виділено фракції водорозчинних полісахаридів (ВРПС) і пектинових речовин (ПР), встановлено їх мономерний склад. Встановлено якісний склад і визначено кількісний вміст суми органічних кислот та кількісний вміст аскорбінової кислоти у сировині досліджуваних видів. Методом ВЕРХ у мильнянки лікарської траві і коренях та методом ГХ/МС у чорнобривців золотистих траві виявлено і встановлено кількісний вміст індивідуальних органічних кислот. Уперше проаналізовано жирнокислотний склад ліпофільних фракцій досліджуваної сировини. У досліджуваних об’єктах уперше проведено визначення амінокислотного та елементного складу. Проведено дослідження якісного складу та кількісного вмісту летких сполук і сапонінів. Методом ВЕРХ у мильнянки лікарської траві і коренях та чорнобривців золотистих траві ідентифіковано та встановлено кількісний вміст індивідуальних речовин фенольної природи: з гідроксикоричних кислот – хлорогенової, кофейної, сирінгової, р-кумарової, транс-ферулової, синапової, транс-цинамової, хінної і гідроксифенілацетатної гідроксикоричних кислот; з флавоноїдів у мильнянки траві – ізокверцитрин і кемпферол; у коренях – кверцетин, у траві чорнобривців – ізокверцитрин, нарингін, кемпферол і кверцетин; з компонентів конденсованих дубильних речовин – галокатехіну та епікатехіну у мильнянки лікарської траві, у коренях – галокатехіну, у чорнобривців золотистих траві – галокатехіну, епікатехінут та епікатехін галату. У мильнянки лікарської траві і коренях ідентифіковано 13 і 12 фенольних сполук, у чорнобривців золотистих траві – 15. Вивчено морфолого-анатомічні особливості будови мильнянки лікарської трави, визначено її основні діагностичні ознаки та запропоновано параметри стандартизації. Уперше визначено числові показники якості досліджуваних видів сировини згідно з вимогами ДФУ. Визначено оптимальні умови одержання густих екстрактів з мильнянки лікарської трави і коренів та сухого екстракту з чорнобривців золотистих трави, визначено їх гостру токсичність і встановлено сечогінну дію. Доведено нефропротекторну активність густих екстрактів з трави і з коренів мильнянки лікарської та антиоксидантну дію сухого екстракту з трави чорнобривців золотистих in vitro.^UThe thesis is devоted tо the study оf cоmmоn sоapwоrt and marigоlds, which, accоrding tо literature sоurces, are used in traditiоnal medicine as diuretics. A comprehensive pharmacognostic study of the Saponaria officinalis herb and roots and the Tagetes lucida herb, was carried out. In the studied raw materials, the presence and quantitative content of carbohydrates, carboxylic and amino acids, volatile compounds, saponins, phenolic compounds - hydroxycinnamic acids, flavonoids, tannins, along with their mineral composition, were found and determined. The polysaccharide complexes were investigated in the Saponaria officinalis herb and roots and the Tagetes lucida herb, the fractions of water-soluble polysaccharides (WPS) and pectin substances (PR) were isolated, and their monomer composition was determined. The qualitative composition was established, and the quantitative content of the sum of organic acids and the quantitative content of ascorbic acid in the raw materials of the studied species was identified and determined. For the first time, the quantitative content of individual organic acids was detected and determined by HPLC in the Saponaria officinalis herb and roots and GC/MS in Tagetes lucida herb. The fatty acid composition of lipophilic fractions of the studied raw materials was analyzed for the first time. The amino acid and elemental composition of the studied objects was determined. The qualitative composition and quantitative content of volatile compounds and saponins were studied. The quantitative content of individual substances of phenolic nature was identified and determined by HPLC method in the soapwort herb and roots and the Tagetes lucida herb: from hydroxycinnamic acids - chlorogenic, caffeic, syringic, p-coumaric, trans-ferulic, synaptic, trans-cinnamic, quinic and hydroxyphenylacetic hydroxycinnamic acids; from flavonoids in the Saponaria officinalis herb - isoquercitrin and kaempferol; in the roots - quercetin, in the Tagetes lucida herb - isoquercitrin, naringin, kaempferol, and quercetin; from the components of condensed tannins - gallocatechin and epicatechin in the Saponaria officinalis herb, in the roots - gallocatechin, in the Tagetes lucida herb - gallocatechin, epicatechin and epicatechin gallate. In the Saponaria officinalis herb and roots, 13 and 12 phenolic compounds were identified, and in the Tagetes lucida herb - 15. The morphological and anatomical features of the structure of the Saponaria officinalis herb were studied, its main diagnostic features were determined, and standardization parameters were proposed. For the first time, the numerical quality indicators of the studied raw materials were determined according to the requirements of the State Pharmacopoeia of Ukraine (SPU). The optimal conditions for obtaining thick extracts of the Saponaria officinalis herb and roots and dry extract of the Tagetes lucida herb were determined, their acute toxicity was identified, and diuretic effect was established. The nephroprotective activity of thick extracts from the herb and roots of Saponaria officinalis and the antioxidant effect of the dry extract from Tagetes lucida herb were proved in vitro.