Розглянуто можливості застосування рухомих фаз (РФ) на основі міцелярних розчинів поверхнево-активних речовин (ПАР) у тонкошаровій хроматографії (ТШХ) із полярною стаціонарною фазою (силікагель). Досліджено розділення 4-ої групи біологічно активних речовин. Виявлено, що найбільш придатною для створення міцелярних РФ для висхідної ТШХ на силікагелі є неіоногенна ПАР Твін-80 у вигляді індивідуальних розчинів або з додаванням спиртів-модифікаторів чи катіонної ПАР цетилпіридиній хлорид. Виявлено специфіку процесів розділення в умовах висхідної ТШХ, зумовлену значним утримуванням міцелярних псевдофаз катіонної та неіонної ПАР стаціонарною фазою силікагелю, що викликає зміни у складі РФ і механізмі розподілу речовин у процесі хроматографування з трифазного. Метод застосовано для виявлення та визначення 15-ти біологічно активних речовин в об'єктах аналізу з різними за складом матрицями: косметичних засобах, зерні, біологічних рідинах (сироватка крові, сеча). Доведено можливість використання міцелярних розчинів ПАР як екстрагентів на стадії пробопідготовки. Встановлено переваги застосування міцелярних РФ: поліпшення екологічності аналізу, коштовність, зменшення загального часу аналізу.